（1）實驗簡介

小管形成實驗是測量在體外血管生成一種快速的,可量化的方法。內(nèi)皮細(xì)胞結(jié)合條件培養(yǎng)基并接種于基底上,易形成三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。之后通過軟件對小管結(jié)果進(jìn)行定量分析。

（2）實驗流程

① 從-20℃冰箱取出基質(zhì)膠，置于4℃冰箱；

② 在冰上將膠加入到96孔板中，每孔50 μl，37℃溫育1 h，使其充分凝固；

③ 收集轉(zhuǎn)染細(xì)胞，用無血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞并進(jìn)行計數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為5×104 個/ml。

④ 取200 μl細(xì)胞懸液接種至膠的表面，置于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h；

⑤ 在倒置相差顯微鏡下觀察，隨機選取6個視野，觀察其管狀排列和管狀結(jié)構(gòu)并計算細(xì)胞總數(shù)量，然后用Image-Pro Plus軟件測量管狀結(jié)構(gòu)總長度。