（1）實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Polymerase Chain Reaction)，簡(jiǎn)稱(chēng)PCR，是一種快速放大擴(kuò)增特定DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，故PCR技術(shù)看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制。

（2）實(shí)驗(yàn)流程

① 待測(cè)樣本提供：組織，約100mg，用干冰運(yùn)輸；細(xì)胞，收集2×106細(xì)胞以上，用干冰運(yùn)輸；全血，1mL以上，置于EDTA抗凝管中，低溫運(yùn)輸。

② 模板制備：提取總RNA，檢測(cè)RNA完整性及濃度，隨后將RNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

③ 引物設(shè)計(jì)及合成：在Genbank中查到待測(cè)基因的mRNA序列，用軟件Primer Premier在其閱讀框內(nèi)設(shè)計(jì)引物。

④ PCR擴(kuò)增：以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。

⑤ 電泳鑒定：取10μl PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測(cè)，紫外燈下觀(guān)察，拍照。

（3）注意事項(xiàng)

① 本實(shí)驗(yàn)通常是以RNA為模板，如果需提取DNA模板，請(qǐng)注明。

② 細(xì)胞樣本可以寄送培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)瓶用無(wú)血清培養(yǎng)基充滿(mǎn)，保證細(xì)胞無(wú)污染。

③ 提供詳細(xì)的待測(cè)基因信息，客戶(hù)也可以提供引物或引物序列。