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(1)實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介
流式細(xì)胞術(shù)工作原理是在細(xì)胞分子水平上通過單克隆抗體對(duì)單個(gè)細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析。它可以高速分析上萬個(gè)細(xì)胞,并能同時(shí)從一個(gè)細(xì)胞中測(cè)得多個(gè)參數(shù),具有速度快、精度高、準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn),是當(dāng)代最先進(jìn)的細(xì)胞定量分析技術(shù)之一。
(2)實(shí)驗(yàn)流程
① 收集約2×106個(gè)細(xì)胞,1100rpm離心4min后棄去上清。
② 以Buffer溶液重懸,吸取100μl細(xì)胞懸液(約3.0×105個(gè)細(xì)胞)加入Ep管內(nèi)。
③ 按量加入抗體(CD90、CD34、CD44、CD106、CD11b、CD29、CD45),避光孵育30min。
④ 每樣品管加入1.5~2ml Buffer溶液,1100rpm離心4min后棄去上清。
⑤ 每樣品管加入300μl
Buffer溶液重懸,上機(jī)檢測(cè)。